Antifungal Activity of Selected Chemical Agents against Phytopathogenic Fungi Spores

Postharvest deterioration has been a major problem associated with yam storage for both famers and traders and it is caused mostly by micro-organisms especially fungi. During the storage of yam, many organisms such as Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Penicillium citrinum and Rhizopus stolonifer are often reported to cause rotting of the stored yams. The aim of this research is to find out the antifungal effect of some commonly used anti-dermatophytic agents, (Fluconazole, Terbinafine Hcl, Ketoconazole, Sodium propionate and Griseofulvin) on the above named fungi spores. This was carried out using zone of inhibition, MICs, MFCs, FICs and FFCs to measure the antifungal activities of the test antifungal agents against the isolated phytopathogenic fungi spores. These agents were found to have fungitoxic effects on the test organisms in the order of: Terbinafine Hcl > Fluconazole > Ketoconazole > Sodium propionate > Griseofulvin. This work indicated that the test antifungal agents were able to inhibit the fungi spores that are widely reported to be associated with yams rot when stored. The observation in this study showed that a good and efficient fungicide against the test organisms that are known to cause yam rot during storage can be effectively arrested with combination of these fungicides.

Potencial fungitóxico de extratos vegetais sobre Curvularia eragrostidis (P. Henn. ) Meyer in vitro / Fungitoxic potential of plant extracts on in vitro Curvularia eragrostidis (P. Henn. ) Meyer

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade fungitóxica dos extratos vegetais de alho, citronela, gengibre e nim no controle in vitro de Curvularia eragrostidis. Os extratos foram testados nas concentrações de 5, 15, 25, 35, e 45%, através da deposição de disco de colônia fúngica em placas de Petri contendo meio BDA, acrescido dos extratos e da testemunha. As placas de Petri foram incubadas a 25 ± 2ºC. Avaliou-se o diâmetro das colônias, a cada 24 horas, em dois sentidos opostos, utilizando régua milimetrada. Determinou-se a contagem de esporos do fungo em hemacitômetro após a incubação. Para a germinação de esporos adicionou-se ao meio BDA 0,1 mL de suspensão de 1,3 x 105 conídios/mL- 1 do fungo, acrescido de 0,1 mL de solução dos extratos espalhadas sobre o meio BDA. As placas de Petri foram divididas em quatro quadrantes e incubadas no regime de luz "claro contínuo" e "escuro contínuo". A avaliação foi realizada após 48 horas de incubação através da percentagem de germinação dos conídios nos tratamentos e na testemunha. De acordo com os resultados, concentrações de 5% dos extratos de gengibre e de nim foram eficientes na percentagem de inibição do crescimento micelial e esporulação de C. eragrostidis. A utilização de todos os extratos a partir da concentração de 25% apresentaram os maiores efeitos fitotóxicos nas análises in vitro, reduzindo o crescimento micelial, a esporulação, e germinação do fungo.

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the fungitoxic activity of plant extracts from garlic, citronella, ginger and neem on the in vitro control of Curvularia eragrostidis. We used the following treatments: extracts of garlic, citronella, ginger and neem (5, 15, 25, 35, 45%) through the deposition of a fungal colony disk obtained from Petri dishes containing PDA medium supplemented with treatments. For control, only water was added. The Petri dishes were incubated at 25 ± 2ºC for seven days. The colony diameter was evaluated in two opposite directions every 24 hours using a millimeter ruler. At the end of the incubation period, the number of spores was counted using a hemocytometer. Spore germination was evaluated by adding to the PDA medium 0.1 mL collected from a suspension of 1.3 x 105 conidia/mL-1 plus 0.1 mL of a solution of each extract spread on the PDA medium. The Petri dishes were divided into four and incubated in either continuous light or continuous dark. The evaluation was performed 48 hours after incubation by determining the germination rate of conidia in comparison to the control. Concentration of 5% of ginger and neen extracts were efficient on the percentage of inhibition of mycelial growth and sporulation of C. eragrostidis. All extracts from the concentration of 25% showed the highest phytotoxic effects in in vitro assays, reducing mycelial growth, sporulation and germination of the fungus.

Avaliação de atividade fungitóxica e isolamento de aloaromadendrano - 4α, 10 ß - diol em Hypericum cordatum / Evaluation of the fungitoxic activity and isolation of alloaromadendrene - 4α, 10 ß - diol in Hypericum cordatum

RESUMO Hypericum cordatum é uma espécie do cerrado que foi selecionada em triagem de plantas com atividade fungitóxica. O objetivo do presente trabalho foi isolar e identificar compostos com atividade antifúngica em extratos de folhas em diclorometano. O pó das folhas das plantas foi submetido à extração exaustiva com éter de petróleo e diclorometano. O extrato em diclorometano, e as frações ativas, foram submetidos à fracionamentos biomonitorados em coluna de Sephadex LH-20, respectivamente, com os eluentes clorofórmio:metanol (1:1) e com um gradiente de hexano:diclorometano (1:4); diclorometano:acetona (3:2 e 1:4), metanol, e água. As frações que mostraram atividade foram submetidas à cromatografia em camada delgada preparativa de sílica gel GF254, sendo que o material de maior massa foi analisado em CLAE semipreparativa. A fração ativa foi analisada por RMN de 1H, tendo sido identificado o aloaromadendrano - 4α -10ß - diol como componente principal da fração. Conclui-se, portanto, que este é um dos compostos responsáveis pela atividade fungitóxica de Hypericum cordatum.

The Hypericum cordatum is a species of the Brazilian Cerrado that was selected in a screening of plants with fungitoxic activities. The aim of this work was to isolate and identify the compounds with antifungal activity in leaf extracts in dichloromethane. For this end, the powder made from the leaves of the plants was submitted to exhaustive extraction with petroleum ether and dichloromethane. The extract in dichloromethane and the active fractions were submitted to bioassay-guided fractionation in Sephadex LH - 20 column, respectively, with the following eluents chloroform:methanol (1:1) and a gradient of hexane:dichlorometane (1:4); dichloromethane:acetone (3:3 and 1:4), methanol and water. Afterward, the fractions that showed some activity were submitted to preparative thin layer chromatography of silica gel GF254 and the material with the greatest mass was submitted to semi-preparative HPLC. The active fraction obtained was analyzed by 1H NMR, and the main component identified was alloaromadendrene-4α-10ß - diol. We may then conclude that this is one of the compounds responsible for the fungitoxic activity of Hypericum cordatum.

Ação fungitóxica do óleo essencial de Tanaecium nocturnum (Barb. Rodr.) Bur. e K. Shum sobre o Aspergillus flavus isolado da castanha-do-Brasil (Bertholletia excelsa) / Fungitoxic action of the essential oil of Tanaecium nocturnum (Barb. Rodr.) Bur. and K. Shum on Aspergillus flavus isolated from the Brazil nut (Bertholletia excelsa)

Neste trabalho, avaliou-se a capacidade fungitóxica do óleo essencial de folhas frescas de Tanaecium nocturnum sobre o Aspergillus flavus isolado da castanha-do-brasil, por meio das técnicas de contato e fumigação. Pelos resultados dos bioensaios realizados até 10 dias de incubação, verificou-se que a inibição total do crescimento micelial ocorreu quando se utilizou o óleo essencial nas concentrações de 782 ppm (técnica de contato) e 1000 ppm (técnica de fumigação). Em ambas as técnicas, o óleo essencial inibiu a esporulação a partir da concentração de 500 ppm. Observou-se que nos cinco primeiros dias de incubação não houve diferença significativa nos resultados apresentados pelas duas técnicas estudadas, havendo a partir daí uma redução da atividade do óleo essencial nas concentrações inferiores a 1000 ppm pelo teste de fumigação. A ação fungitóxica do óleo essencial sobre o microrganismo estudado pode ser atribuída à presença do benzaldeído (composto majoritário do óleo essencial estudado), em associação com outros compostos também presentes nesse óleo essencial, tais como; álcool benzílico, benzoato de benzila e mandelonitrila.

The present work sought to evaluate the fungitoxic activity of the essential oil from fresh Tanaecium nocturnum fresh leaves on Aspergillus flavus isolated from Brazil nuts, using contact and fumigation techniques. The results of bioassays performed up to 10 days of incubation demonstrated that total inhibition of mycelial growth occurred when using the essential oil at concentrations of 782 ppm (contact technique) and 1000 ppm (fumigation technique). In both techniques, the essential oil inhibited the formation of spores at the concentration of 500 ppm. No significant difference in the results presented by the two techniques was observed in the first five days of incubation. After this period, the essential oil showed a reduction in activity at concentrations lower than 1000 ppm in the fumigation test. The fungitoxic activity of the essential oil on the organism studied can be attributed to the presence of benzaldehyde (major component of the essential oil), in combination with other compounds also present in this oil, such as, benzyl alcohol, benzyl benzoate and mandelonitrila.

Biciclogermacreno, resveratrol e atividade antifúngica em extratos de folhas de Cissus verticillata (L) Nicolson & Jarvis (Vitaceae) / Bicyclogermacrene, resveratrol and fungitoxic activity on leaves extracts of Cissus verticillata L. Nicolson & Jarvis (Vitaceae)

Cissus verticillata L. (Vitaceae) tem sido empregada popularmente como anti-diabética. Nessa espécie foi também detectada atividade fungitóxica. O objetivo do presente trabalho foi realizar a identificação dos compostos fungitóxicos em extratos de folhas. O extrato etanólico foi submetido a fracionamento com solventes de diferentes polaridades (hexano, clorofórmio, acetato de etila e butanol) e seu efeito antifúngico foi analisado frente a Cladosporium sphaerospermum. Os extratos em clorofórmio e acetato de etila mostraram atividade, e foram fracionados por cromatografia em coluna e cromatografia preparativa em placas de sílica, respectivamente. Três terpenóides foram isolados do extrato em clorofórmio; um deles foi identificado, por análise em CG-EM, como um sesquiterpeno, o biciclogermacreno. O composto ativo do extrato em acetato de etila foi identificado, por análises em CLAE, como o estilbeno resveratrol.

Cissus verticillata L. (Vitaceae) is popularly employed as hypoglicemic and it shows fungitoxic activity. This work aims at identification of fungitoxic compounds on extracts of leaves. The ethanol extract was partitioned using solvents of different polarities (hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol) and its fungitoxic activity was analysed upon Cladosporium sphaerospermum. The chloroform and ethyl acetate extracts showed activity and they were fractionated by column chromatography and preparative TLC, respectively. Three terpenoids were isolated from the chloroform extract, one of them identified by GLC-MS analysis as sesquiterpene bicyclogermacrene. The active compound of the ethyl acetate extract was identified by HPLC analyses as stilbene resveratrol.